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傳代：吸去培養液。用0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA洗一次，以去除血清（血清會抑制胰酶的活性）。加2-3毫升Trypsin-EDTA，放在37℃培養箱內約5分鐘，直到細胞全部脫落。加6-8毫升培養液，用移液器把細胞吹散。加適量的細胞到新的培養器皿中。（以1：4到1：8為宜，傳代期間培養液更換1-2次）

凍存：95%培養液+5%DMSO凍存于液氮。

二、293細胞

293細胞比較容易轉染，是一個很常用的表達研究外源基因的細胞株。293細胞的一個衍生株：293T/17的轉染效率更高，成為廣大研究者研究基因功能的一個強大工具。

293細胞的缺陷是生長過程中貼壁強度比較小。所以在實驗過程中容易流失，從而影響實驗結果。如果一個實驗室新得到的293細胞是郵寄得到的并且細胞在培養瓶中，就需要讓細胞沉降幾天時間，因為大量細胞會漂浮在培養液里。

來源：人體腎臟

形態：上皮細胞

生長特性：貼壁

注釋：該細胞含腺病毒5 DNA 。

培養液： MEM（含 2 mM L-谷氨酰胺和 Earle＇s BSS，1.5 g/L NaHCO3, 0.1 mM 非必需氨基酸, 1.0 mM 丙酮酸鈉）， 10% 馬血清（熱滅活）。

傳代：吸去培養液。用0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA洗一次，以去除血清（血清會抑制胰酶的活性）。加2-3毫升Trypsin-EDTA，放在37℃培養箱內約5分鐘，直到細胞全部脫落。加6-8毫升培養液，用移液器把細胞吹散。加適量的細胞到新的培養器皿中。（以1：2到1：4為宜，傳代期間培養液2-3天更換1次）

凍存：95%培養液+5%DMSO凍存于液氮。

三、vero細胞

Vero細胞被成功的用來培養狂犬病疫苗、乙腦疫苗等多種疫苗，在非典期間又為研究冠狀病毒做出貢獻，在醫藥研究中廣泛應用。

來源：非洲綠猴腎細胞

形態：上皮細胞

生長特性：貼壁

注釋：該細胞是日本千葉大學的Y. Yasumura和Y. Kawakita于1962年3月27日從一只正常的成年非洲綠猴腎組織培養出來的。

培養液：MEM（含 2 mM L-谷氨酰胺和 Earle＇s BSS，1.5 g/L NaHCO3, 0.1 mM 非必需氨基酸, 1.0 mM 丙酮酸鈉）， 10%胎牛血清

傳代：吸去培養液。用 0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA洗一次，以去除血清（血清會抑制胰酶的活性）。加2-3毫升Trypsin-EDTA，放在37℃培養箱內約5分鐘，直到細胞全部脫落。加6-8毫升培養液，用移液器把細胞吹散。加適量的細胞到新的培養器皿中。（以1:3至1:6為宜，傳代期間培養液每周更換2-3次）

凍存： 95%培養液+5%DMSO凍存于液氮。

四、NIH-3T3細胞

NIH-3T3細胞在實驗室常用來做轉染及基因表達的研究。易感病毒有鼠肉瘤病毒和鼠白血病毒。

來源： Mus musculus（小家鼠）胚胎

形態：成纖維細胞樣

生長特性：貼壁

注釋：為得到適合轉染得細胞株，NIH-3T3細胞至少連續克隆過5次。NIH-3T3細胞容易轉染DNA，鼠痘病毒陰性。

培養液：DMEM（含4mM L-谷氨酰胺、4.5g/L葡萄糖、1.5g/L碳酸氫鈉），10%小牛血清

傳代：吸去培養液。（不要讓細胞長滿培養器皿，長滿80%為宜）用 0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA洗一次，以去除血清（血清會抑制胰酶的活性）。加2-3毫升Trypsin-EDTA，放在37℃培養箱內約5分鐘，直到細胞全部脫落。加6-8毫升培養液，用移液器把細胞吹散。加適量的細胞到新的培養器皿中。（以3-5x103/cm2為宜，傳代期間培養液每周更換2次）

凍存： 95%培養液+5%DMSO凍存于液氮。

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