我公司錢經(jīng)理近期在相關(guān)科研帖子中發(fā)現(xiàn)ELISA實驗操作者提問怎樣選擇試劑盒,客戶們在選產(chǎn)品的時候擔(dān)心買到偽劣產(chǎn)品也是正常現(xiàn)象,近些年來逐漸有假試劑盒在網(wǎng)絡(luò)平臺中崛起。所以大家在購買試劑盒的時候一定要謹(jǐn)慎,貨比三家。那么我們要怎樣選擇區(qū)分呢?試劑盒變了樣,您還認(rèn)得出不?●試劑盒造假手段
1.一些比較差的造假手段:隨便弄的一個盒子,標(biāo)準(zhǔn)品也好,抗體也好,可能都沒有,就是做根本都做不出來的那種,這種一般價格特別便宜,商家也是采取賣一個就跑的形式。 2.*新造假手段:利用一些人對國外知名品牌的信賴,在國內(nèi)做的假盒子,在國外注冊一個英文網(wǎng)站,并有一個個國外的辦公室,發(fā)貨還是以國內(nèi)為主。遇到此類情況,可看一下,該公司網(wǎng)站提供的產(chǎn)品中,是否只有elisa試劑盒,一般國外的做ELISA試劑盒的公司,會提供相應(yīng)的抗體,且種類也不可能無限多,此為初步判定方法。 ●ELISA試劑盒的優(yōu)劣如何區(qū)分?
1.原料及制造粗糙的試劑盒
表現(xiàn)為:準(zhǔn)確度不高,重復(fù)性不好。
原因可能為抗體配對效果不是*佳,抗體識別抗原的表位容易被破壞,包被抗體或檢測抗體雜蛋白較多,沒有純化或純化效果不好,影響檢測的靈敏度和準(zhǔn)確度。
2.客戶辯別檢測方法:
可采用已知濃度的重組細胞因子,稀釋到檢測范圍內(nèi)作為樣本加入,看檢測的準(zhǔn)確性。
對用待測指標(biāo)的重組細胞因子做試劑盒說明書上標(biāo)定的*小濃度稀釋,可測出靈敏度,建議5個復(fù)孔以上才有意義。一般廠家以20個復(fù)孔做出的結(jié)果作為檢測限。用此實驗可驗證出所購試劑盒的靈敏度是否如說明書所述,也可判斷出所購試劑盒是否有夸大之說。
選定一個檢測范圍內(nèi)的濃度做多孔重復(fù),可看出平行性好不好。即板內(nèi)CV值的大小,此操作時需要小心加樣的準(zhǔn)確性。對一些制作較粗糙的試劑盒來說,板間CV值是較大的。
如果有相同指標(biāo)的進口試劑盒,可用對方的標(biāo)準(zhǔn)品作為樣本,分別加入各自的試劑盒做檢測,以檢測試劑盒的真實性,準(zhǔn)確性。如其中一種是知名的進口試劑盒,比較可靠的話,可作為標(biāo)準(zhǔn)來驗證另一試劑盒的準(zhǔn)確程度。
●ELISA試劑盒實驗者如何分辨?
對說明書上有說能做血清血漿的試劑盒,如有緩沖液。建議如下:用已知濃度的待測指標(biāo)蛋白加入所測種屬的血清直接加樣和用分析緩沖液按說明書分別加樣,得出結(jié)果如差異過大,即可得知分析緩沖液的效果如何,是否確實有作用。